ELISA анализ: транскрипт

Ензимен имуноанализ (ELISA) е метод за изследване на кръвта в лабораторията на базата на търсенето на специални клетки - антитела срещу различни заболявания. Методът позволява не само да се идентифицира патогена, но и да се установи на какъв етап е патологичният процес. Последното е много важно за прогнозата и по-нататъшното лечение на пациента.

Предимства и недостатъци на метода

Сред всички съвременни диагностични методи, ELISA е най-новаторската и технически точна. Основните му предимства са:

1. Възможност за търсене на всички съществуващи антитела срещу инфекциозни заболявания в кръвта на пациента.
2. Висока наличност на изследователски метод. Към днешна дата всяка средна лаборатория може да извършва ELISA анализи.
3. Почти 100% специфичност и чувствителност на метода.
4. Възможност за търсене на антитела и антигени, както и установяване на етапа на патологичния процес и проследяване на неговата динамика, благодарение на сравнението на броя.

Такива редица предимства пред другите тестове напълно засенчват единствения недостатък на анализа: той е в състояние да открие антитела, но не и самия патоген.

Ключови термини за оценка на анализа

За да разберете какво се случва с анализа ELISA, какво е това и как се извършва, трябва да се запознаете с основните термини, използвани от специалистите.

1. Антитялото е протеин, който се продуцира от клетките. имунната система човешки (лимфоцити тип В). Те реагират със специфична реакция на поглъщане на чужд агент или вещество. Друго име за антитела са имуноглобулините, които принадлежат към различни класове: A, E, M, G. Те се различават един от друг по маса, скорост на реакция, полу-живот и редица други характеристики. Обикновено човешката кръв съдържа главно имуноглобулини от клас G. Ако възникне някаква инфекция, броят на имуноглобулините А и М рязко се увеличава. Имуноглобулини Е участват в алергичните реакции.
2. Антиген е чужд агент с органичен произход и високо молекулно тегло. Най-често представляват патогени или техните биологично активни вещества.
3. Антиген-антитяло комплекс, или имунен комплекс, е директна комбинация от чуждо вещество и имуноглобулин, което води до имунен отговор.

Същност и обхват на метода

Пациентите често имат въпрос: ELISA, какво е това, как се извършва и за какво се използва? Можете да кажете за метода, като опишете накратко неговите етапи.

Подготвителен етап . Лабораторният лекар използва специална таблетка, в която са 96 дупки. На повърхността на всяка ямка е приложен антиген от специфичен патоген.

Етап 1. Извършва се вземане на кръвни проби, които след това се прилагат капка по капка в кладенеца. В кладенеца се инициира реакция между антигена и антитялото в кръвта.

Етап 2. В кладенеца е в ход реакцията с образуването на имунни комплекси. Резултатът е вещество от определен цвят. Интензивността на оцветяване зависи от количеството на антителата в кръвта на пациента към всеки специфичен патоген.

Етап 3. Оценка на резултата чрез фотометрия. За целта използвайте специално устройство, наречено "спектрофотометър". Използва се за сравняване на плътността на материала в ямката и контролната проба. След това устройството генерира резултат чрез математически анализ.

Оценка на резултатите и целта на ELISA

Тълкуването на резултата зависи от няколко важни нюанса:

1. Ямки с оптична плътност.
2. Производител на плочи с отвори (тестови системи).
3. Лабораторията, в която е проведено изследването.

Като се имат предвид тези нюанси, никога не трябва да сравнявате два резултата от различни тестови системи или от различни лаборатории.

Друг важен момент, засягащ анализа на ELISA, е така наречената авидност на антитела. Този параметър характеризира количеството антиген, силата на свързване в комплекса "антиген-антитяло". В основата на нейното определение е обработката на имунния комплекс на урея с цел разрешаване на протеиновите структури. Това ви позволява да унищожите слабите връзки между антигена и антитялото и да оставите само силни. Ценността на изследванията върху ненаситността е, че тя може да се използва за установяване на продължителността на инфекцията. Тази информация е изключително важна за поставяне на диагноза при бременни жени.

Анализът на кръвта чрез ELISA е:

1. За търсене на различни патогенни антигени.
2. За изследване на хормоналните нива.
3. За изследване за наличие на автоимунна патология.
4. За откриване на маркери на рак.

Сортове ELISA

Анализът ELISA има следните разновидности:

1. Индиректен.
2. Direct.
3. Конкурентни.
4. Метод на блокиране

Но всъщност днес се използва само метод, наречен ELISA (ензимно свързан имуносорбентен анализ). Тя се основава на описаната по-горе реакция на образуване на комплекс от антиген с антитяло с промяна в цвета на повърхността на ямката.

Количественият анализ на кръвта ELISA заслужава специално внимание. Това не е вид анализ, а начин за оценка на резултатите. Благодарение на него се преброява броят на антителата и се определят класовете им. Резултатът зависи от оптичната плътност на пробата, тестовата система, върху която е извършена ELISA, и от лабораторията.

Заболявания, открити чрез ELISA

ELISA е кръвен тест, който ви позволява да идентифицирате огромен брой различни инфекциозни заболявания. Освен това, със същата точност са открити вирусни и бактериални заболявания. Например, използвайки образуването на имунни комплекси, може да се докаже наличието на антигени на причинителите на следните заболявания:

1. Вирусен хепатит A, B и C.
2. HIV инфекция и СПИН.
3. Вирус на Епщайн-Бар.
4. Херпес вирус от всички видове.
5. Цитомегаловирус.
6. Шарка.
7. Токсоплазмоза.
8. Сифилис и много болести, предавани по полов път.
9. Паразитоза и други заболявания.

В допълнение, ELISA може да открие:

1. Маркери за рак - TNF (тумор некрозисфактор), PSA (простатен-специфичен антиген), СЕА (раково-ембрионален антиген), СА-125 (тумор на яйчниците)
2. Бременност Хормон - hCG (хорионгонадотропин).
3. Нарушения на репродуктивната система: хормони на женската и мъжката репродуктивна система.
4. Патология на щитовидната жлеза.

Важно е да се спомене, че ELISA тестът за HIV днес е основният начин за диагностициране на това опасно заболяване.

Материал за технология ELISA и ограда

За извършване на ELISA при пациент се взема кръв на празен стомах. Освен това, от кръвта се получава серум, който се използва директно за анализ. В допълнение, ELISA може да се извърши върху цереброспиналната течност (CSF), цервикална слуз канал (шийката на матката), околоплодна течност и дори стъкловидното тяло (очната ябълка).

Преди да дадете кръв на пациента, те са предупредени, че не трябва да приема никакви лекарства и се препоръчва лечението да завърши с антибиотици и антивирусни лекарства поне две седмици преди вземането на кръвта.

Време за получаване и тълкуване на резултатите

Времето за получаване на отговор от лабораторията не зависи от скоростта на нейната работа, а на какъв етап е заболяването и какви антитела вече са се появили в кръвта. Така например: М имуноглобулини се появяват приблизително 2 седмици след вземане на кръв за анализ и означават, че процесът е в стадия на първична инфекция или е настъпило обостряне на хроничното. В същото време, антитела от класове M и G се появяват по време на първичната инфекция. Освен това, последните могат да бъдат открити след 4 седмици.

IgA се появява след 2-3 седмици самостоятелно или с М, което означава остра инфекция, или с G, което показва хроничен процес.

Такива различни периоди от появата на антитела в кръвта ще накарат пациента да изчака дълго време за резултата. Приемливо е да се изчака повече от месец след извършването на ELISA. Декодирането и интерпретацията от лекаря също отнемат известно време.