Как се използват серологични тестове за диагностика?

Серологията (от лат. Serum - серум), наречена наука за свойствата кръвен серум човек. Определението за серологични реакции ще бъде представено по-долу.

Една от основните задачи на днешната серология е разработването на методи за производство на специфични серуми за диагностика и лечение, оценка на степента на тяхната активност и определяне на механизмите на експозиция на човека. Серологичен кръвен тест е лабораторен изследователски метод за определяне в биологичния материал на пациента антигени или антитела (специфични протеини), които кръвният серум на пациента съдържа. Серологичните изследвания не се считат за 100% специфични и чувствителни при диагностицирането на инфекциозни заболявания. Следователно оценката на резултатите от изследването е възможна само при отчитане на клиничната картина на заболяването като цяло. Експертите предпочитат по-точна диагностика на няколко теста.

Серологични реакции - какво е това?

При лабораторната диагностика на повечето инфекциозни заболявания се използва метод за откриване на антитела в кръвта на пациента, които се генерират срещу патогенните антигени. Те са били използвани в медицинската практика от началото на ХХ век. С развитието на науката, съвременните лекари са се научили да идентифицират антигени в структурата на микробите и също разкриват химическата формула на техните токсини. Това позволи да се развият серуми, предназначени не само за лечение, но и за диагностициране на инфекциозни заболявания. Серумът се произвежда чрез прилагане на атенюирани патогени към лабораторни животни. Установяването на серологични реакции е много популярно.

След стандартна експозиция, препаратите се приготвят от кръвта на лабораторни животни. Те се използват в серологични реакции за идентифициране на микроби или техните токсини. Методът се основава на имунния отговор на човешкия организъм. Това изследване се използва при диагностицирането на инфекциозни заболявания за идентифициране на наличието или отсъствието на антитела в пациент срещу вируси или бактерии, както и за определяне на кръвната група. Външните прояви на серологични реакции зависят от условията на поведение и от състоянието на антигените в кръвта на пациента. Ако микробите не се разтворят, те ще се утаят, лизират, свържат или обездвижат в серума. Ако се получи разтваряне на антигени, тогава се открива явлението неутрализация или утаяване. Серологични реакции се използват дълго време.

Учебен материал

При провеждане на серологично изследване с използване на частици от биологичен материал, събрани от пациента: кръв, слюнка, изпражнения. В редица случаи се изследва материал, събран в някои обекти на околната среда: вода, земя.

Как точно се извършват серологични реакции в микробиологията?

Метод за събиране на биологичен материал

При този анализ не е необходимо да се подготвя специфично пациента. Вземането на кръв се извършва сутрин преди хранене в стаята за лечение на медицинско заведение, като се използват стандартни хематологични методи. За този анализ, вземането на кръвни проби се извършва по два начина: венозна кръв се взема от кубиталната вена и капилярната кръв се взема от пръста. Материалът за анализ е в стерилни запечатани тръби.

Какво е необходимо за определяне на серологичните реакции?

Характеристики на транспортиране и съхранение на биологичен материал

Веднага след вземането на кръвта, тя се транспортира до специална лаборатория, където се приготвя серум на същия ден. Можете да го съхранявате за не повече от четири или шест дни в хладилник при температура от 2 до 4 градуса. Ако искате да запазите серума за по-дълъг период, той се замразява. За да не се нарушава качеството на биологичния материал, замразяването и размразяването могат да се извършват само веднъж. Дългосрочното съхранение прави антителата неактивни и те губят някои от своите свойства. Имуноглобулините от клас М се считат за най-чувствителни към по-ниски температури на съхранение.

След разтопяването на суроватката, той се смесва добре, за да се получи хомогенен състав. Той помага за възстановяване на концентрацията на антитела, съдържащи се в този материал.

Серологични изследвания - за какво се използва?

Методът на серологичните реакции се използва за диагностициране на ехинококоза, трихинелоза, токсокароза, описторхоза, цистицероза, токсоплазмоза, амебиаза, лямблиоза. Това е необходимо, за да се определи ефективността на предписания курс на лечение, както и да се открие рецидив на заболяването, което е последвало възстановяването на пациента. Къде е най-честото използване на серологични реакции?

Основни диагностични методи

Микробиолозите и имунолозите в повечето случаи прилагат реакцията на аглутинация, утаяване, неутрализация, реакция с участието на комплемент, използвайки белязани антитела и антигени (радиоимунологични, имуноферментални, имунофлуоресцентни методи).

Аглутинационна реакция (RA)

Серологичният аглутинационен тест се извършва много просто и същевременно много ясно. Това ви позволява бързо да определите дали антигените съдържат серум от пациента. Реакцията се използва за диагностика коремен тиф паратиф и тиф. Тя се основава на специфично взаимодействие между човешки антитела (аглутинини) и микроби (аглутеногени). В процеса на тяхното взаимодействие образуването на частици се утаява. Това е положителен знак. За реакцията можете да използвате живи или убити микробни агенти, гъбички, протозои, кръвни клетки и соматични клетки. Химичното изследване се провежда с разделяне на два етапа: на първия етап антителата се смесват с антигени, последвано от утаяване (образува се аглутинат) по време на реакцията.

Серологичният диагностичен метод може да бъде различен.

Непряка аглютинация на реакцията (RPGA)

Тази реакция се счита за по-чувствителна от предишната. Използва се за диагностициране на заболявания, причинени от различни бактерии, вътреклетъчни паразити, протозои. Този анализ може да открие концентрацията на антитела, дори в много малки количества. За неговото прилагане е необходимо да се използват пречистени червени кръвни клетки на овчи и човешки червени кръвни клетки, предварително третирани с антитела или антигени (в зависимост от това, което искат да намерят в лабораторията). В някои случаи се използват човешки имуноглобулинови червени кръвни клетки. Счита се, че серологичната реакция на червените кръвни клетки се провежда, ако червените кръвни клетки се утаят на дъното на тръбата. Когато клетките са разположени под формата на обърнат купол и заемат цялото дъно на тръбата, това показва положителна реакция. Прилага се отрицателна реакция, ако червените кръвни клетки се отлагат под формата на колона или бутон в средата на дъното.

Провеждат се серологични тестове за сифилис.

Реакционно утаяване (RP)

За да се идентифицират изключително малки частици на антигени, се използва реакция на утаяване. Това може да бъде протеин (или част от него), съединения на протеини, липиди или въглехидрати, частично представени бактерии и техните токсини. Серум за анализ, използващ тази реакция, се получава чрез заразяване на лабораторни животни, обикновено зайци. Този метод се използва за получаване на почти всеки преципитиращ серум.

Механизмът на серологичната реакция на утаяване е сходен всъщност с реакцията на аглутинация. Антитела, които се съдържат в серума, се смесват с антигени в колоиден разтвор свързване с големи протеинови молекули. Тези молекули се отлагат на дъното на тръбата или върху гел субстрат. Тази версия на изследването се счита за много точна и може да се използва за откриване дори на незначителни дози от веществото. Реакцията на утаяване, която също се използва широко в съдебната медицина, дава възможност за диагностициране на чума, туларемия, антракс, менингит.

Реакциите от този тип се извършват не само в течна среда, но за целта те използват агарен гел. Тази процедура се нарича метод на дифузно утаяване. Той дава възможност за изследване на комплексни антигенни смеси. В гела, антителата и антигените се движат един към друг с различни скорости и, след среща, създават линии на утаяване, по които се прави заключение.

Какво друго е известен метод на серологична реакция?

Реакция на неутрализация (PH)

Антитоксичните серуми неутрализират действието на екзотоксини, произвеждани от микроорганизми. Серологичният отговор от този тип се основава на това взаимодействие. В микробиологията този метод се използва за титруване на серуми, токсини и токсоиди, както и за определяне на тяхната терапевтична активност. В допълнение, като се използва тази реакция, може да се определи идентичността на екзотоксина с определен тип или тип. По този начин се диагностицират тетанус, дифтерия и ботулизъм. Изследването се провежда както върху таблетката, така и в гел субстрата.

Също така серологични реакции се използват за други тестове.

Реакцията на лизис (RL)

Серумът, който влиза в тялото на пациента, освен основната функционална задача, осигурява и пасивен имунитет с разтварящи свойства. Той допринася за разтварянето на микроби, клетъчни извънземни елементи и вируси, влизащи в тялото на пациента. В зависимост от състава на антителата серумът се подразделя на бактериолизини, цитолизини, спирохетолизини, хемолизини и други. Тези антитела се наричат ​​комплименти. Антителата съдържат почти всички течности на човешкото тяло, те имат сложна протеинова структура и са много чувствителни към повишена температура, разклащане, излагане на киселина и пряка слънчева светлина. Но в сухо състояние те могат да запазят своите лизиращи свойства до 6 месеца.

Провеждат се следните серологични реакции на този вид кръв: бактериолиза, хемолиза.

Реакцията на бактериолиза се провежда, като се използва серумът на пациента и специфичен имунен серум с активни микроби. Ако има достатъчно комплимент в кръвта, лабораторният техник ще бъде свидетел на лизиса на бактериите и реакцията ще се счита за положителна. Вторият тип серологична реакция от този тип е, че еритроцитите на пациента се обработват със серум, който съдържа хемолизини, които се активират само ако има някакъв вид комплимент. Ако е налице, изследователят ще наблюдава разтварянето на червените кръвни клетки. Този метод се използва при провеждане на реакцията на Васерман (сифилис).

Реакция за обвързване на комплимента (RSK)

Това проучване се използва за откриване на антитела срещу инфекцията в кръвта на пациента и за идентифициране на патогени по тяхната антигенна структура. Всички описани предишни реакции се считат за прости. CSC е сложна реакция, тъй като включва не два, а три компонента: антитяло, антиген и комплимент. Същността му се състои във взаимодействието между антитялото и антигена, което се проявява само в присъствието на комплементни протеини, адсорбирани върху образувания комплекс AG-AT. Антигените след добавяне на комплимент значително се променят, именно тези трансформации показват качеството на реакцията. Това може да бъде лизис, хемолиза, имобилизиране, бактерицидно или бактериостатично действие.

Горните реакции се различават един от друг по техника на производство, но всички те основно имат взаимодействие на антиген-антитяло и се използват за идентифицирането им. Съществуват няколко вида серологични реакции с подобен принцип на действие.