Сряда Ендо. Състав и подготовка на хранителната среда

19.05.2019

Всеки любител на микробиологията знае, че отглеждането на всяка колония изисква подходяща хранителна среда. В същото време всяка хранителна среда има свои характеристики, както в подготовката, така и в употреба. Ако решите да отглеждате колония от ентеробактерии, тогава ще ви трябва среда на Ендо. Именно за това се отнася тази статия.

Каква е тази хранителна среда?

Сряда

Околна среда Ендо се използва за отстраняване на ентеробактерии и има диференциален диагностичен характер. Защо се нарича така? Много е просто - носи името на своя откривател - Шигеру Ендо. Това е известен микробиолог от японски произход.

Каква е особеността на тази среда?

Не е тайна, че в микробиологията има концепция за грам-положителни и грам-отрицателни бактерии. Така че, ако решите да отглеждате колония от грам-отрицателни бактерии, за това имате нужда от среда, която ще потиска растежа на грам-положителните бактерии. Тази функция може лесно да се управлява от средата на Endo. Поради селективните си свойства предотвратява развитието на грам-положителни колонии.

Среден състав

Характеристиките на всяка среда зависят предимно от съставките. Съставът на средата Endo включва:

  • натриев сулфат;
  • натриев фосфат;
  • месен пептон агар;
  • магента;
  • натриев карбонат;
  • лактоза.

Благодарение на ниската си цена при подготовката, средата Endo е много търсена сред аматьорските микробиолози.

Какъв е принципът на околната среда?

Натриевият сулфид и фуксинът, присъстващи в неговия състав, допринасят за образуването на реагент на Шиф. Тоест, натриев сулфид ще обезцвети фуксин. В резултат на тази реакция се образува фуксиева киселина.

Е. coli

Всеки знае, че ентеробактериалните колонии могат да ферментират лактоза, по време на тази реакция се образува мравчена киселина. От хода на химията е известно, че мравчената киселина взаимодейства с алдехиди и дава качествена реакция. Поради това колонията ентеробактерии ще бъде боядисана в розово-червен цвят. Други грамположителни бактерии (с изключение на ентеробактерии) не могат да разграждат лактозата, така че те няма да бъдат оцветени.

В резултат на това само ентеробактериите под формата на пурпурни пръчици ще се открояват на петриевото блюдо с ендо среда, която има розов цвят. Всички други колонии или ще бъдат унищожени, или няма да се открояват на фона на хранителната среда.

Приготвяне на хранителен субстрат

Колония от бактерии

В микробиологията средата Endo е една от най-важните хранителни среди. За да си приготвите такъв субстрат, просто следвайте инструкциите по-долу.

1. Готвене бульон. Всяко месо или кост с остатъчно месо ще свърши, трябва да отстраните мазнините и сухожилията колкото е възможно повече. Месото се готви за около 20-25 минути при 100 градуса. След охлаждане на бульон да се замразят капки мазнини.

2. Филтрирайте получения бульон през плътен памучен филтър до абсолютна прозрачност. Трябва да се отбележи, че филтрирането през марля е нежелателно, тъй като съществува риск от удряне на малки парчета месо.

3. Претеглете останалите съставки. Трябва да направим суха среда и да приготвим реактив на Шиф. За това трябва да претеглите:

  • пептон 1.3 g;
  • лактоза 1 g;
  • агар 2 g;
  • Фуксин 0,2 g

4. Добавете фуксина в 30 ml вода, смесете фуксина с вода. След това се добавя концентриран разтвор на натриев сулфит, докато цвета на фуксина изчезне.

5. Утайка от фурсерова киселина се утаява, като тази утайка се отстранява чрез филтруване.

6. Добавете гореща среда към горещ бульон.

7. Изчакайте разтварянето и добавете реактива на Шиф.

8. Полученият субстрат се стерилизира за около 30 минути при температура от около 125 градуса.

Резултатите от културите трябва да се запазят около 5 дни, но колкото по-дълго ги държите, толкова по-ясен резултат ще бъдат колониите на бактериите.